L’imagerie de temps de vie de fluorescence (FLIM pour Fluorescence Lifetime Imaging microscopy) produit une image formée par les différences de constantes de déclin de fluorescence des fluorophores présents dans l’échantillon imagé. Cette donnée, indépendante de la concentration, de l’absorption par l’échantillon, de l’épaisseur de l’échantillon ou du photoblanchiment, est également très sensible à des paramètres locaux tels que le pH, la concentration en ions ou en oxygène, la proximité d’accepteurs d’énergie, ce qui en fait une technique de choix pour l’imagerie fonctionnelle pour caractériser localement des processus physico-chimiques ayant lieu dans des échantillons biologiques aussi bien que dans des matériaux. Quelques exemples étudiés au laboratoire seront présentés pour illustrer ces potentialités pour différents types de luminophores.